Sage Science Pippin HT 简易操作手册

一 准备样品

样品的前处理：

1. DNA 样品的离子强度要比缓冲液的低

2. DNA 样品是去蛋白

3. 上样量不超过 1.5ug

4. 了解待回收的 DNA 片段大小

5. 20ul DNA 样品（TE 溶解）+5ul marker/上样缓冲液（3%、2%、1.5%），混匀

震荡离心。0.75%预置胶 20ulDNA 样品+5ul 上样缓冲液，marker 一个泳道直接 25ul。

二 编程

Protocol Editor 界面下: 1. 选择新建 Protocol 2. 选择预制胶种类 3. 设置回收的片段大小 4. 指定参考泳道（内标/外标） 5. 默认选择“洗提完成后终止”。

三 光学校正（Pippin HT 校正系数是 0.7）

将光学校正板黑色一面朝下，放到泳道卡槽内，点击“校正”。每次实验前都必

须要进行光路校正。

四 准备预制胶

1 检查预制胶

a 检查预制胶中缓冲液量，不足加满。

b 检查凝胶柱是否断裂

c 检查是否有气泡

2 准备上样

a 排除洗提孔后面的气泡

b 撕掉密封条，将预制胶置于仪器槽内

c 从上方的每个缓冲液孔中吸走 80ul 缓冲液（3%、2%、1.5%预置胶）； 或者吸

走 150ul 缓冲液（0.75%预置胶）。

d 清空洗提孔中的缓冲液, 加入 30ul 的新鲜缓冲液

e 用胶带封闭洗提孔

f 检查样品孔溶液，不足时补满至 40ul

3 连续性检查（测试电流。连续性跟温度有关系，所以缓冲液要提前从冰箱中拿

出进行室温平衡）

五 上样

吸掉 30ul 缓冲液，加入 25ul 样品，合上盖。

六 运行程序

七 回收目的片段